Preparación de extensiones colorables
El material que contienen las células o bacterias (tierra, orina, pis, leche, heces saliva) se diluye en agua, solución salina o caldo. A continuación, con el ansa, se extiende sobre el porta una fina y homogénea capa de suspensión en un área aprox. de 1 cm de diámetro [FROTIS]. Debe hacerse moviendo el asa con un movimiento rotatorio. Recuerde flamear el asa en el mechero antes de usarla. Extendido el frotis, debe secarse, y a continuación se calienta durante 2 o 3 seg. sobre llama el mechero, esto adhiere las bacterias y/o células al vidrio [FIJACIÓN].Estos preparados no son duraderos y sirven solo para hacer una vista rápida (Mejor técnica Ver pag)
Colorantes y tinciones
La mayoría de los colorantes pueden ser clasificados en dos grupos:1. Aquellos en los cuales el ión portador del color es el anión. Ej.: EOSINA2. Aquellos done el ión portador del color es el catión. Ej.: AZUL DE METILENO. Los colorantes ácidos (2) tiñen elementos nucleares, mientras que los básicos (1) los elementos citoplasmáticos de las células. Un colorante básico es una molécula de anilina que tiene una o más cargas positivas en su porción coloreada y su formula general se presenta: ANILINA + Cl-Estos colorantes reaccionan con los grupos aniónicos de los componentes texturales, que son los grupos fosfato de los ácidos nucleicos, los grupos sulfato de los glucosaminoglucanos y los grupos carboxilo de las proteínas. La reacción de los grupos depende del pH. Un colorante ácido es aquel que lleva una carga negativa en la parte coloreada de la molécula y su fórmula general se representa: Na+ ANILINA-Los colorantes ácidos se unen primariamente a los componentes texturales por medio de enlaces electroestáticos de manera similar pero opuesta a la de los colorantes básicos. Las anilinas ácidas reaccionan con los grupos catiónicos como los grupos amino ionizados de las proteínas. Los componentes que reaccionan con un colorante básico se llaman basófilos y los que lo hacen con uno ácido, acidófilo.
COLORANTE
CARÁCTER
COLOR
ELEMENTOS DE TINCION
Acido
Azul
Núcleo celular, membrana plasmática
Básico
Azul purpureo
Núcleos, ribosomas y REG
Acido
Rosado
Citoplasma
celeste
Paredes celulosicas
Azul
Rojo
Paredes secundarias lignifica das, cutinizadas o suberifica das; en algunos casos tiñe nucleolos
Verde
Básico
Verde
Básico
Azul
Rojo
Grasas, cutina y suberina, celulas adiposas
Negro
Básico
Acido
Rojo
Colágeno
Acido
Amarillo
Bordeau
Fibras elasticas
Violeta azulado
Fibras elasticas
Azul
Macrofagos
Básico
Rojo
Acido
Naranja
Metacromasia
Es el fenómeno por el cual un colorante (Ej: azul de toluidina) cambia de color tras reaccionar con un componente estructural. Los componentes que pueden colorearse metacromáticamente se llaman cromótropos, y son principalmente los glucosaminoglucanos y las nucleoproteínas.
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